1    一种窄分子量分布高脱乙酰度的壳寡糖的制备方法  

采用盐酸、硫酸和醋酸制得混合酸，在混合酸和高温条件下虾蟹壳中的甲壳素大分子链能够断裂，尤其是连接单体的醚键。由于本发明采用混合酸和高温进行反应，反应过程较为剧烈，本发明中加入以丁二醇、异丙醇和正辛醇组成的多元醇能够缓解反应的剧烈发生，同时提高产物分子量的窄分布，本发明制得的壳寡糖分子量分布指数为1.005‑1.15，脱乙酰度为93‑99％。

2    壳聚糖酶OUC-CsnA4-S49I及其应用和制备壳寡糖的方法

所述壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。所述壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I在制备壳寡糖中的应用，所述壳寡糖的聚合度为2～5。所述制备壳寡糖的方法，以壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I降解壳聚糖得到壳寡糖，壳寡糖的聚合度为2～5。本发明的壳聚糖酶OUC‑CsnA4‑S49I具有产物特异性，降解壳聚糖可得到高聚合度的壳寡糖。本发明拓宽了GH 46家族的壳聚糖酶酶解壳聚糖的产物谱，可用于制备高聚合度的壳寡糖，应用潜力巨大，应用前景广阔。

3    迷迭香酸改性壳寡糖及其制备方法与应用

制备出了一种迷迭香改性壳寡糖(COS‑RA)，该化合物具有远高于天然壳寡糖的抗氧化活性，对果实中的花青素具有显著的提高作用，进而促进果实着色。将其制成水溶制剂对果实喷施后，果实的总花青素含量提高40.2％～54.5％，其中各种单体花青素的含量都有显著地提升。与天然壳寡糖相比，该化合物在促进果实着色的应用中效果更好，用量更小，着色更均匀，成熟期间花青素含量累积更高，且同样具备壳寡糖的无毒、易生物降解等特性，因而具有更好的田间应用效果，可广泛应用于农业生产领域中。

4    低分子量壳寡糖的提取工艺 

先将短柄帚霉‑红球菌发酵物、木瓜蛋白酶、纤维素酶混合制成复合酶，接着将复合酶利用N‑琥珀酰壳聚糖为载体，经N，N’‑亚甲基双丙烯酰胺交联，得到酶制剂；再将螃蟹壳粉碎成螃蟹壳粉，接着将螃蟹壳粉与玉米浆混合得到混合料，灭菌，向混合料中接入复合菌，在高频交变磁场条件下发酵，得到发酵产物；然后将发酵产物进行电解处理，加入酶制剂，酶解，灭酶，γ‑射线辐照，后处理，即得壳寡糖产品。采用天然提取，原料成本低，所得壳寡糖产品的分子量低，应用前景广阔。

5    壳寡糖组合物及其制备方法和应用

壳寡糖为从数均分子量约为1000的壳寡糖COST中纯化得到数均分子量约为628.5的壳寡糖COS46，其脱乙酰度约97.71％，产率约30％，COS46纯度高达92.00％，组成中DP＝4的组分浓度为0.79mg/mL，含量为43.26％，DP＝5的组分浓度为0.41mg/mL，含量为22.34％，DP＝6的组分浓度为0.48mg/mL，含量为26.40％。本发明制备的壳寡糖COS46具有抗氧化性能，均能有效清除羟基自由基和DPPH自由基，能有效促进Keap‑1/Nrf2/HO‑1内源性抗氧化通路激活，可显著抵御非酒精性急性肝损伤。

6    一种聚合度5~6壳寡糖的制备方法

以壳聚糖为原料，采用改良的蒸汽爆破反应器进行爆破反应后，固液分离，固体通过复合酸水解、采用冰乙醇进行沉淀、阳离子交换树脂吸附与解析附、活性炭脱色，微滤，酸性冷乙醇沉淀得聚合度5～6壳寡糖。本发明可以制备出聚合度5～6的高纯度壳寡糖产品，产品收率高，副产物少，同时生产过程稳定，重复性好，操作简便可控，适用于聚合度5～6壳寡糖产品的批量化生产。

7    一种壳寡糖的制备装置及其制备方法 

包括箱体，箱体的顶部上表面开设有进料口，箱体的底部开设有出料口，进料口的表面安装有进料阀，出料口的表面安装有出料阀，箱体顶部上表面固定连接有电机座，电机座的表面固定安装有搅拌装置，搅拌装置与箱体转动安装，箱体的内壁靠近出料口的一端固定连接有固定环，固定环的表面沿中心对称固定连接有弧形凸起，本发明弹簧被压缩产生的反作用力作用于转动块的表面，使得圆柱能够与固定环或者弧形凸起的表面紧贴，在升降柱转动的过程中，呈现往复性的上下移动，进一步保证搅拌混合的效果，同时提高了整体的制备效率。

8    全脱乙酰化壳寡糖及其制备方法和应用

该制备方法先将浓度为0.1％‑0.2％壳寡糖溶液与氢型强酸性离子交换树脂按体积比为1：(0.5‑1)混合，搅拌吸附5h‑10h；再向其加入稀盐酸溶液，在60℃‑80℃的条件下，加热5h‑10h；再加入氨水，搅拌解吸2h‑5h，最后将得到的解吸液冷冻干燥，获得全脱乙酰化壳寡糖。该制备方法操作简单、所用原料成本低，无需使用高浓度无机酸作为催化剂，降低了实验的风险性和对设备的损耗，是一种安全高效、绿色环保的制备方法；使用该制备方法制得的全脱乙酰化壳寡糖产率较高，可广泛的应用于抗菌、防腐、抗氧化方面。

9    一种贝莱斯芽孢杆菌复配壳寡糖发酵菌剂及其应用 

贝莱斯芽孢杆菌复配壳寡糖发酵菌剂，包括贝莱斯芽孢杆菌剂和壳聚糖，所述贝莱斯芽孢杆菌剂由贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）BF017002制成，贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus velezensis）BF017002于2022年07月11日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:M20221086。本发明利用具有较强抑菌活性的贝莱斯芽孢杆菌BF017002，在前期发酵获得的初始发酵菌液后，复配壳寡糖，继续发酵3‑5d，获得复合发酵菌剂，该菌剂对番茄颈腐根腐病的防治效果达到80%以上。

10    一种β-环糊精包被壳寡糖及其制备方法

该制备方法是先向质量百分比浓度为2.0％‑5.0％的壳聚糖盐酸盐溶液中加入β‑环糊精，使壳聚糖盐酸盐溶液与β‑环糊精在混合液中的质量百分比浓度比例为1:1；再加入壳聚糖酶，得到β‑环糊精包被壳寡糖。该制备方法操作简单，风险性低，所用药品无毒无害，可以有效地抑制壳寡糖褐变，避免了现有技术中Mn2+对人体的伤害，适合大规模地应用于工业生产方面。并且使用该制备方法得到的β‑环糊精包被壳寡糖色值低，产率较高，无毒无害，有效地解决了壳寡糖普遍纯度低，品质差，生物活性低的问题。

11    一种助溶壳寡糖或壳聚糖的方法及速溶粉剂

助溶壳寡糖或壳聚糖的方法包括S1、按照设定比例量取易溶肥料、壳寡糖或壳聚糖原粉；S2、在密闭环境下，将步骤S1量取的易溶肥料与壳寡糖或壳聚糖原粉混合、搅拌均匀，形成速溶粉剂。易溶肥料与壳寡糖或壳聚糖原粉混合形成速溶粉剂，小分子的壳寡糖或壳聚糖粘附在易溶肥料颗粒的外侧。速溶粉剂在水中溶解时，易溶肥料的分子在水中迅速由高浓度向低浓度扩散、稀释，带动粘附在其上的壳寡糖或壳聚糖分子一起由高浓度向低浓度扩散、稀释，达到助溶壳寡糖或壳聚糖的效果。

12    利用毕赤酵母工程菌产壳聚糖酶并制备壳寡糖的方法

该菌株经发酵诱导产酶，获得壳聚糖酶。该酶酶解90％脱乙酰度壳聚糖，得三糖～五糖为主的壳寡糖，均分子量约800；酶解70％脱乙酰度壳聚糖，得四糖以上的壳寡糖，均分子量约1800。本发明的毕赤酵母工程菌产壳聚糖酶活性高，可工业规模高效制备壳寡糖；同时针对不同脱乙酰壳聚糖底物可制备不同组分、不同均分子量的壳寡糖，可应用于不同领域。

13    一种以壳聚糖为辅助碳源来发酵黑曲霉并制备含壳寡糖的微生物菌剂及其制备方法 

该微生物菌剂中，黑曲霉的有效活菌数为2‑20亿/ml，壳寡糖含量为1‑1.6％；在微生物菌剂的制备过程中，采用流加壳聚糖的方式向发酵液中加入壳聚糖液体，利用黑曲霉的代谢产物将壳聚糖酶解成壳寡糖，并以壳寡糖为辅助碳源进行发酵，一方面降低壳聚糖酶解成本，另一方面降低培养过程中碳源的加入，降低发酵成本。本发明提供的微生物菌剂，能够对作物产生促生作用。

14    一种双途径合成壳寡糖的全细胞及其生产方法 

通过过表达N‑乙酰氨基葡萄糖转运蛋白、N‑乙酰氨基葡萄糖激酶、磷酸化N‑乙酰氨基葡萄糖变位酶、几丁质合成酶、脱乙酰基酶五种酶蛋白，并结合胞内已知的UDP‑N‑乙酰氨基葡萄糖的合成途径，组合构建了以葡萄糖和N‑乙酰氨基葡萄糖为前体的双途径合成壳寡糖的全细胞。本发明的全细胞，可以生产聚合度可控(DP＆lt;10)、分子量均一(～1000Da)的壳寡糖。本发明采用全细胞生产的壳寡糖，最终获得胞外壳寡糖的含量可达20g/L，纯度较高，对于下游提取工艺降低了成本，同时全细胞生产方法具有过程简单、周期短、产量高等优势，工业化生产潜力明显。

15    一种壳寡糖制备用酶解设备

包括罐体的内部设有搅拌机构，所述罐体的底端两侧均固定连接有底座，底座的上端面设有升降架，所述升降架上设有用于将搅拌机构吊起的升降机构，所述升降机构包括设于升降架内部两侧面的电动滑轨，两个电动滑轨上的活动块之间固定连接有升降杆，所述升降杆的底端中部设有与搅拌机构相连接的挂钩；本实用新型通过设在减速电机顶端的吊环与设于升降架内部的升降机构，将减速电机底端连接的搅拌机构抽离出罐体内部，实现对搅拌装置整体的拆卸控制。

16    一种壳寡糖稳态化制备方法  

步骤：将壳聚糖溶解到缓冲盐溶液中，得到壳聚糖溶液；在所得的壳聚糖溶液中加入壳聚糖酶，进行酶解反应；酶解结束后，酶解液迅速灭活，采用超滤膜预过滤；采用电渗‑超滤一体膜技术精制，预过滤后的壳寡糖混合液在电场作用下，根据其不同的分子量和荷电性迁移，在回收室中得到除去缓冲盐的窄分子量分布的壳寡糖溶液；浓缩干燥，得到壳二糖到壳五糖含量在80％以上的窄分布壳寡糖。与现有技术相比，本发明利用电渗‑超滤一体膜技术去除了产品中夹带的缓冲盐，解决了壳寡糖产品褐变问题，同时获得壳二糖‑壳五糖含量在80％以上的窄分布壳寡糖。

17    壳寡糖、解淀粉芽孢杆菌、香菇多糖的复配组合物及其在促进黄瓜幼苗生长中的应用

该复配组合物为液体形态，其中，所述壳寡糖的浓度为100‑700mg/L，所述解淀粉芽孢杆菌的活菌数为105‑108cfu/mL，所述香菇多糖的为400‑1000倍香菇多糖稀释液。该复配组合物能够有效促进黄瓜幼苗长势、根系发育及光合作用，其促进效果明显大于单独施用壳寡糖溶液或解淀粉芽孢杆菌培养液或香菇多糖溶液的效果，同时也优于壳寡糖溶液和解淀粉芽孢杆菌的复配，表现出明显的协同增效作用。同时，该复配组合物对基质土壤养分的改善也具有更显著的效果，并且能显著缓解低温胁迫对黄瓜幼苗长势的危害，提升了黄瓜幼苗的低温抗性。

18    一种壳寡糖-马尾藻提取物反应物的制备方法和应用   

该制备方法包括水体预处理、原料溶解、添加马尾藻提取物、静止沉降、离心除杂和透析的步骤，包括：蒸馏水超声脱气1h，调整pH值为8～9；依次加入壳寡糖和马尾藻提取物避光和室温条件下缓慢搅拌至充分溶解；于4℃过夜静止；冷冻高速离心，去除沉淀；上清液在去离子水中透析除杂，即得。本发明通过壳聚糖与马尾藻提取物反应得到壳寡糖‑马尾藻提取物反应物，其可以通过抑制角质形成细胞产生PEG2，从而减轻对皮下感受器的刺激达到舒缓功效，具有抗炎与舒缓作用，在医用消炎领域具有潜在应用前景。

19    一种具有抗幽门螺旋杆菌的高含量壳寡糖的制备方法

步骤：1)单因素实验确定最佳实验参数：通过单因素实验分析酶解温度、复合酶配比以及反应pH因素对于反应产物壳寡糖含量的影响，确定最佳实验参数；2)三因素三水平的参数实验确立最佳酶解工艺参数：根据步骤1)确定的最佳实验参数，依据Box‑Behnken设计原则设计试验，利用Design Expert软件进行数据分析，建立响应面回归模拟方程，对试验结果进行预测分析，确立复合酶降解制备壳寡糖的最佳酶解工艺参数；3)采用高脱乙酰度壳聚糖为反应底物制备壳寡糖，应用最佳酶解工艺参数提高壳寡糖的含量，实现规模化降解壳聚糖。

20    一种减少壳寡糖非酶褐变的生产工艺

主要基于壳寡糖在生产过程中，减少对氧气的接触，降低非酶褐变，通过在酶降解过程中通入保护气减少氧气的接触以及在喷雾干燥过程中减少氧气的接触，从而减少壳寡糖的非酶褐变，生产的壳寡糖产品中的壳寡糖有效含量至少提高了6％。

21    一种含褐藻寡糖和壳寡糖的组合物及其制备方法和应用 

组成为：褐藻寡糖2wt％‑10wt％，壳寡糖2wt％‑10wt％，双乙酸钠0.1wt％‑1wt％，咪唑啉5wt％‑10wt％，PH值为5‑8，溶剂为水。本发明组合物中加入的咪唑啉为两性表面活性剂，助剂自身无毒，可将褐藻寡糖和壳寡糖混合在一起且不会产生絮凝现象。提供的组合物产品具有明显的协同增效作用，既有促进植物生根生长的功能，也有增加植物自身抗病的能力。

22    一种含喹啉基团的壳寡糖季铵盐衍生物及制备方法和应用 

含喹啉基团的壳寡糖季铵盐衍生物及其制备方法和医药、功能食品保健、化妆品等领域中的应用。含喹啉基团的壳寡糖季铵盐衍生物的结构如式一所示，优点是将喹啉基团通过化学方法接枝到壳寡糖中，提高了壳寡糖的生物活性，制备过程简单，副反应少，且所用材料成本低。经研究证明，衍生物水溶性良好，具有很好的抗氧化活性和抑菌活性，在医药、功能食品保健，特别是化妆品行业都有广大应用价值。

23   制备壳寡糖的方法 

（1）取壳聚糖，在2.0～2.5 MPa的蒸汽压力下爆破4分钟后快速降压，得到预处理的壳聚糖；

（2）向浓度为2%～10%的预处理的壳聚糖溶液中加入SEQ ID NO.1所示的壳聚糖酶CsnBUT，在50～58℃条件下孵育20～80小时，得到降解产物，降解产物中包括壳二糖、壳三糖和壳四糖，以壳三糖为主。壳寡糖的制备方法，可高效地降解壳聚糖，过程中不使用酸，绿色无污染；制备得到的壳寡糖中壳三糖的纯度高，可大大减少寡糖精制过程后期产品分离纯化的耗时和操作成本。本发明的方法可一步制备生产具有理想DP的COS，具有巨大的经济效益。

24    制备壳寡糖的方法、壳聚糖酶及其基因、酶制剂与应用  

制备壳寡糖的方法为：采用SEQIDNO.1所示的壳聚糖酶酶解壳聚糖或胶质甲壳素生产壳寡糖，酶解条件为：pH4.0～8.0，温度50～80℃。本发明的壳聚糖酶，其氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，编码该壳聚糖酶的基因如SEQIDNO.2所示。本发明的酶制剂，含有该壳聚糖酶。所述壳聚糖酶、酶制剂在降解壳聚糖或胶质甲壳素中的应用，在制备壳寡糖中的应用。本发明采用特定的壳聚糖酶制备壳寡糖，催化活性高，可在高温条件下进行。本发明的壳聚糖酶可以在高温条件下酶解壳聚糖，高效酶解壳聚糖制备壳寡糖。

25    多酚壳寡糖复合物及其制备方法和应用

步骤：(1)酶解或者发酵处理荞麦麸皮；(2)乙醇提取步骤(1)处理的荞麦麸皮多酚，所得多酚溶液以质量比1:1‑5与壳寡糖溶液混合，在振荡器上振荡离心后取上清冷冻干燥得到多酚壳寡糖复合物。本申请的多酚壳寡糖复合物通过对酶解处理前后荞麦麸皮总酚含量和抗氧化活性测定得出，复合酶解大大提高了多酚溶出率和抗氧化活性。同时，通过对多酚、壳寡糖和多酚壳寡糖复合物抗氧化性测定得出，复合物抗氧化性显著提高。

26    一种制备高聚合度壳寡糖的方法  

向含有Mn＆lt;supgt;2+＆lt;/supgt;的壳聚糖溶液中加入壳聚糖酶或含有壳聚糖酶的溶液，进行酶解，即得聚合度为3～6的壳寡糖；所述壳聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述含有壳聚糖酶的溶液通过以下方法制备得到：向发酵培养基中接种枯草芽孢杆菌，发酵，离心，即得。本发明的方法通过金属离子与生物酶法耦合催化调节，可使酶解产物的聚合度由2～4改变为3～6。本发明所采用的壳聚糖酶，发酵产酶时间短，可以高效降解壳聚糖，10％浓度壳聚糖溶液6h转化率可达85％以上，且加酶量仅为2.5U/g壳聚糖。本发明所采用的枯草芽孢杆菌，产酶方式为胞外酶，培养菌体后将发酵液离心取上清液即可直接用于壳聚糖的降解。

27    一种单一高聚合度壳寡糖的制备方法  

步骤：将全脱乙酰化的壳寡糖溶于水，制成壳寡糖溶液，然后加入乙醇进行沉淀，离心，收集沉淀；其中，加入乙醇的体积占最终溶液体积的比例为30‑55％；将收集的沉淀用乙酸缓冲溶液溶解后，用填料为Bio‑gel P10的凝胶排阻色谱柱进行分离纯化，洗脱液为乙酸缓冲溶液，通过示差折光检测器检测流出的洗脱液，收集检测到的三个洗脱液组分；将所收集的三个洗脱液组分分别经填料为Sephadex G10的凝胶排阻色谱柱进行脱盐，浓缩后即得到单一高聚合度壳寡糖。本发明所公开的方法可制备纯度高的壳八糖、壳九糖和壳十糖标准品，且制备方法简单可行。

28    壳寡糖及其制备方法  

步骤：（1）将酶分散液与活性炭混合，在预设温度下温育预设时间，得到活性碳固载酶分散液；（2）将壳聚糖分散于分散介质中，得到壳聚糖分散液；（3）将所述壳聚糖分散液与所述活性炭固载酶分散液混合，反应得到壳寡糖；其中，所述酶分散液为第一酶与果胶酶的混合物分散于分散剂而得。相应的，本发明还公开了一种由上述制备方法制备得到的壳寡糖。实施本发明，可简化酶固载工艺，提升酶回收利用效率，降低壳寡糖的生产成本。

29    壳寡糖的制备方法、壳寡糖以及壳寡糖保健品 

壳寡糖的制备方法包括如下步骤：配制含有壳聚糖、酸和双氧水的混合反应物；将混合反应物置于高频交变磁场内，第一次搅拌得到第一反应液；补充酸和双氧水；接着将第一反应液置于高频交变磁场内，第二次搅拌得到第二反应液；分离提纯，得到壳寡糖。这种壳寡糖的制备方法，通过在高频交变磁场下搅拌含有壳聚糖、酸和双氧水的混合反应物，通过混合反应物切割磁场形成电流，从而配合壳聚糖的化学降解。这种壳寡糖的制备方法降低了酸和双氧水的用量，并且无需高压电场，是一种环保且安全的壳寡糖的制备方法，具有极大的应用前景。

30    一种从虾壳中提取壳寡糖的生产方法

依次包括捣碎、脱钙、酶解除蛋白、酶解提糖、浓缩冻干等工艺制备壳寡糖。通过该方法，可以获得与市售的食品级壳寡糖在纯度及平均聚合度方面相似、抗氧化活性更高的壳寡糖。不仅有效利用了虾加工的下脚料虾壳等废弃物，提高了虾产品的加工附加值，而且减少了环境污染，工艺过程绿色、无污染，且生产设备简单、成本低，易于实现工业化生产，对于虾产业的健康发展具有十分重要的意义。

31    一种壳寡糖单体的制备方法  

对壳寡糖溶液进行预处理，使高浓度的壳寡糖溶液在80～90％乙醇溶液中分级沉淀，高聚合度壳寡糖被沉淀下来，小聚合度壳寡糖留存在上清液中，沉淀进行第二次处理，两次得到的上清液合并，旋转蒸发浓缩，浓缩液冷冻干燥，得到聚合度1～5含量高的壳寡糖粗品。再进行阳离子交换色谱分离，采用阶段性等度洗脱，一个洗脱液浓度只洗脱一个聚合度壳寡糖，实现分离过程无需检测，得到壳寡糖单体的纯度达到90％以上，产量达到克级别。

32    壳聚糖、壳寡糖在抑制蛋白质吸收中的应用   

用于沉淀游离状态的氨基酸和抑制蛋白质的水解，以及由蛋白质摄入和蛋白质消化过程中引发的疾病。

33    一种膜分离工艺制备壳寡糖的方法

步骤：S1、选取适量动物外壳原料，洗净，其中动物外壳包括虾壳、蟹壳，应选取甲壳素含量较高的动物外壳作为原料；S2、对动物外壳原料进行脱钙、脱蛋白、脱乙酰基处理；S3、对经步骤S2处理的原料进行酶解处理，得到原液；S4、将原液导入超滤膜系统，进行超滤膜过滤处理，得到处理液；S5、将处理液导入纳滤膜系统，进行纳滤膜过滤，得到浓缩液和清液，清液导入反渗透膜系统进一步过滤后，回收利用；S6、对步骤S5处理得到的浓缩液进行干燥处理；本发明整体流程简单，成本低，生产效率高，通过超滤膜和纳滤膜对原液进行过滤，系统稳定性好，产品纯度高。

34    一种高氨基含量壳寡糖的制备方法  

配制有机酸水溶液，pH＝3～5，缓慢加入壳聚糖固体，搅拌均匀后体系呈悬浮状，壳聚糖的质量百分浓度为8％～12％，超声；利用40％氢氧化钠溶液调节pH至5～7；加入木瓜蛋白酶和纤维素酶组成的复合酶，升温至55±5℃，反应时间为5～8h；将所得溶液通过微滤膜，再通过纳滤膜浓缩至浓度为15％～20％，所得溶液进行喷雾干燥制得高氨基含量粉末状壳寡糖产品。所得产品分子量分布较窄，壳寡糖氨基含量高，分子量可以达到3000Da以下。操作方便、安全经济、收率高、质量可控、技术成熟，能够比较有效地克服反应进程中氨基脱落问题，容易实现产业化。

35    制备甲壳寡糖的方法 

先将甲壳素进行预处理得到纳米甲壳素，然后用甲壳素酶SbChiAJ143酶水解纳米甲壳素，制得甲壳寡糖；其中，所述甲壳素酶SbChiAJ143的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。所述将甲壳素进行预处理得到纳米甲壳素的方式为：使用研磨机对甲壳素水溶液进行研磨。本发明的制备甲壳寡糖的方法，结合了物理研磨法和酶法，效率高。与单独酶法水解胶质甲壳素制备甲壳寡糖方法相比，甲壳素处理不使用任何化学试剂，节约了成本，简化了步骤，无环境污染。本发明的制备甲壳寡糖的方法，绿色、环保、高效，具有良好的工业应用潜质。

36    一种壳寡糖的制备方法  

为将壳聚糖溶解后配制成壳聚糖溶液，调节pH值后加入壳聚糖进行酶解；酶解得到的酶解液依次通过微滤除杂、超滤除杂、浓缩除盐后收集浓缩液，最后将浓缩液冷冻干燥，得到壳寡糖。本发明的制备方法以60％以上的收率制备出分子量集中在1‑3kDa的壳寡糖，制备的壳寡糖水溶性好、生物活性高，本发明的制备方法收率高，生产成本低，适于规模化生产。

37    壳寡糖的制备方法 

该制备方法具体包括：(1)壳聚糖胶体化：将壳聚糖溶于酸溶液，得到胶体壳聚糖，加热；(2)酶解：向胶体壳聚糖中加入复合酶A，升温搅拌后加入复合酶B，恒温搅拌，再加入壳聚糖酶，继续搅拌得到壳聚糖酶解液；(3)分离：将壳聚糖酶解液经离心、膜浓缩后，即得壳寡糖。上述制备方法能够得到一种分子量分布窄、含量高的壳寡糖，进而可将其更有效地应用于肥料、饲料以及农药等领域中。

38    发酵法制备微生物源壳寡糖的方法

利用曲霉、地衣芽孢杆菌和乳酸菌进行三菌混合发酵制备壳寡糖，具体包括下述步骤：(1)曲霉发酵；(2)地衣芽孢杆菌发酵；(3)乳酸菌发酵；(4)除渣除菌处理；(5)吸附处理；(6)醇沉干燥处理。本发明的优点：(1)发酵法生产壳寡糖的工艺不受原料来源、季节的外界环境影响和限制，生产过程更加可控，产品品质更稳定。(2)全程绿色生产，强酸强碱和发酵废液排放较小，污染环境小，生产条件温和，能耗低，符合国家节能減排政策。通过本发明的方法制备的微生物源壳寡糖，分子量分布较集中，最优条件下壳五糖占比可达到92.3％。

39    壳聚糖酶及其突变体在制备壳寡糖中的应用 

所提供的突变体相比于出发壳聚糖酶具有更好的温度耐受性和pH值应用范围，从而使提供的壳聚糖酶突变体能应用于实际生产。本发明首先提供一种壳聚糖酶，其氨基酸序列为SEQIDNO:2；本发明再一个方面提供一种壳聚糖酶突变体，其氨基酸序列为SEQIDNO:4。本发明的壳聚糖酶突变体与出发蛋白酶相比具有更高的温度耐受性与更高的催化效率，具有更好的工业应用前景。

40   含低分子壳寡糖的组合物、制剂及其应用 

组合物由低分子量壳寡糖、茉莉酸甲酯和二氢茉莉酸丙酯按重量比1‑10:0.5‑5:0.5‑5组成，所述低分子量壳聚糖的平均分子量为1000‑2000Da。1000‑2000Da平均分子量的壳寡糖、茉莉酸甲酯和二氢茉莉酸丙酯可以协同增效，该分子段的壳寡糖通过作物特殊的茉莉酸信号通路，激活作物体内酶系活性，达到作物健壮与增产提质的应用目的。

41    壳寡糖的制备方法及减肥片  

包括：S1)将壳聚糖在酸性水溶液中溶胀，然后加入壳聚糖酶，加热进行酶解，得到酶解液；S2)将所述酶解液经灭酶处理、澄清处理后，得到数均分子量≤1Kda的液体壳寡糖。与现有技术相比，本发明采用生物酶解法制备数均分子量≤1Kda的壳寡糖，酶解结束后进行了灭酶处理，没有引入别的物质，保证了产品的安全性，为制备天然类物质减肥产品提供了可靠原料。进一步采用天然糖类物质壳寡糖(脱乙酰度≥90％、数均分子量≤1KDa)制备减肥片，在不影响食欲、无腹泻的情况，具有增加脂质的排泄量、改善血脂紊乱、减少脂肪组织增生，达到减肥降脂的效果，是首个天然糖类减肥新原料。

42    微生物源壳寡糖的制备方法 

包括壳聚糖酶工程菌BC002菌体培养，壳聚糖溶液的制备，壳聚糖溶液酶解，壳聚糖溶液分离纯化，壳聚糖溶液冷冻干燥等步骤。利用本发明提供的方法制备得到的壳寡糖的收率为43.20％，壳寡糖分子量范围为986‑1114Da，蛋白质含量为0.015％、灰分含量为0.30％。制备的壳寡糖，分子量分布窄、纯度高；对大肠杆菌与铜绿假单胞菌抑制效果好作用；细胞毒性低；拥有较好的抗敏、抗炎活性。

43    一种壳寡糖分离方法   

步骤1：取壳寡糖样品加水配制成浓度为0.5‑2mg/mL壳寡糖水溶液；步骤2：取铝制点样板，将壳寡糖水溶液点样在铝制点样板的一端，然后将点样后的铝制点样板置于装有展开剂的层析缸中，待溶剂前进到铝制点样板的另一端后，往铝制点样板上喷洒显色剂，喷洒完成后在40‑60℃条件下烘烤至铝制点样板上的斑点显色清晰即可。该分离方法简单，且分离效果佳，同时成本低廉，同时还可利用该方法对壳寡糖进行鉴别。

44    微波-过氧化物耦合降解壳聚糖制备壳寡糖的方法 

以壳聚糖为原料，采用微波和过氧乙酸耦合降解方式，实现了壳寡糖的便捷、高效、经济及清洁制备。在适宜的条件下，壳寡糖产物的粘均分子量最低至1700，壳寡糖的收率最高达93.6%，过程具有工艺简单、反应条件温和、产率高及过程清洁等显著特点，是一种具有工业化应用前景的壳寡糖制备技术。

45   聚合度为4-6的壳寡糖的制备方法

抑制脂肪吸收的聚合度为4‑6的壳寡糖的制备工艺。通过角蛋白酶与β‑葡聚糖酶的联合应用，获得了分子量分步均匀的聚合度为4‑6的壳寡糖。本发明所述制备方法，大大缩短了酶解时间，平均产率高达87%。

46    农业用壳寡糖、肥料及其制备方法  

壳寡糖由壳聚糖在酸性环境中，经溶菌酶酶解得到，将壳寡糖加入到肥料中，即得壳寡糖肥料，本申请制备的壳寡糖质量稳定，配伍性好，施用于作物不会产生副作用。

47    特定聚合度的壳寡糖的制备方法

步骤：S1、壳聚糖提纯；S2、制备壳聚糖溶液；S3、阶段一水解：向壳聚糖溶液中加入非特异性酶，超声反应0.5‑1.5h，之后升温灭活，中和，经离心过滤得聚合度为65‑115的低分子量壳聚糖溶液；S4、阶段二水解：向低分子量壳聚糖溶液中加入葡聚糖酶，反应1‑2h，之后升温灭活，中和，经离心过滤得聚合度为5‑7的壳寡糖混合物溶液，经分离、纯化、干燥处理后得聚合度5‑7的壳寡糖粉末。本发明先后采用对大分子亲和力高的非特异性酶和对小分子亲和力高的特异性酶‑葡聚糖酶作用壳聚糖，使反应速度大大提高，酶解反应在3.5h内即可完成，极大提升生产效率。

48    一种壳寡糖组合物及其制备方法和应用

主要包括壳寡糖、抗氧化剂、渗透压调节剂、pH调节剂等，其中壳寡糖由壳寡糖1000(COST)和壳寡糖3000(COSM)组成。本发明的组合物以注射剂的形式，制备工艺简便，便于工业化生产。本发明提供的壳寡糖组合物能够显著降低对乙酰氨基酚诱导肝脏损伤时的ALT和AST的升高，能够降低MDA和升高GSH含量，说明COST和COSM能减少氧化型损伤，此外还可显著升高肝脏抗氧化酶的含量，包括SOD、GSH‑Px、CAT，表明其能够增加肝脏的抗氧化能力。

49    一种高浓度、低分子量液体壳寡糖的生产工艺    

解决了高浓度液体壳寡糖生产困难、高分子产品不易吸收、混配性差的问题。其技术要点是：高浓度壳聚糖加酸溶胀，反应釜中增加通风，辅助搅拌均匀，停风、停搅拌静置2‑5h，然后加入过量特异性高酶活壳聚糖酶进行酶解反应，同时进行通风，待粘度降至80mpa.s‑100mpa.s时，开启搅拌，停止通风，搅拌至反应结束。该工艺生产得到的液体壳寡糖含量可达到20‑25％，远超过现有市场上壳寡糖产品的正常生产浓度，分子量可控制在600‑1500Da之间，被植物吸收利用后能更好的发挥其诱抗作用。该发明可大大降低生产能耗，节约生产成本，同时也降低了运输费用等，更好的提高了生产效率。

50    一种含壳寡糖的肥料增效剂及其制备方法 

所述含壳寡糖的肥料增效剂，包括虾皮、蟹壳下脚料65‑75份、腐熟菌3‑6份、碳源12‑14份、氮源6‑8份、植物生长调节剂0.6‑1.5份、中微量元素2‑3份、水35‑45份，本发明制得的增效剂能够增加作物产量并提高抗病能力，采用微生物将原料分解，产生壳寡糖，生产过程能耗少、不污染环境，绿色环保，有效的利用虾皮蟹壳等原料，极大程度的提高了废物的利用率。

51    一种水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法  

步骤：(1)将壳寡糖降解液通过陶瓷膜进行预处理，去除降解液中的壳寡糖和其它不溶杂质，得到陶瓷膜透过液；(2)采用超滤膜将陶瓷膜透过液进一步提纯，去除大分子多糖和其它杂质，得到超滤透过液；(3)采用纳滤膜对超滤透过液进行浓缩‑加水四级分离浓缩，去除无机盐和单糖，得到壳寡糖纳滤浓缩液；(4)对最终浓缩的壳寡糖浓缩液进行喷雾干燥，得到高纯度的壳寡糖粉末。工艺简单，过程无相变，能耗较低，易于工业化生产。该方法可提高壳寡糖的得率，得到高纯度的平均分子量小于1000的壳二糖‑壳六糖，得到的壳寡糖高纯度、分子量分布窄，适用于制备符合医药级的壳寡糖产品。

52    一种用芳香醛修饰壳寡糖制备壳寡糖单体的方法 

该方法先将壳寡糖溶解并加入芳香醛修饰，然后上样到大孔树脂层析柱，用0‑70%的乙醇水溶液梯度洗脱，同时采用紫外检测器以波长260‑280nm在线监测芳香醛修饰壳寡糖单体的出峰情况，收集相应芳香醛修饰壳寡糖单体洗脱液，旋蒸除去乙醇，以稀盐酸溶液调节pH为1.5‑2.5，室温搅拌充分释放出游离芳香醛和壳寡糖单体，加入大孔树脂吸附游离芳香醛，获得壳寡糖单体溶液，旋蒸除去残留的盐酸，最后冷冻干燥，获得可长期保存的壳寡糖单体盐酸盐固体粉末。

53    提高免疫力的壳寡糖的制备工艺  

步骤：(1)(1)将壳聚糖和乙酸水溶液混合，搅拌得到壳聚糖溶液；(2)将壳聚糖溶液中加入过氧化氢水溶液，搅拌得到混合液，将混合液超声后得到降解液；(3)将降解液减压浓缩后加入质量分数为80‑95％的乙醇，搅拌，静置，过滤，得到滤饼，滤饼用无水乙醇洗涤，干燥，得到壳寡糖；(4)将壳寡糖和水混合，加入多糖，再喷雾干燥，得到所述提高免疫力的壳寡糖。本发明提高免疫力的壳寡糖的制备工艺，通过将化学降解法和物理降解法相结合，显著缩短了降解时间，并且壳聚糖降解完全，壳寡糖纯度高，得到的提高免疫力的壳寡糖的稳定性和抗氧化活性好，并且具有显著的提升免疫力的作用。

54    低聚壳寡糖单体的制备方法 

对壳聚糖溶液进行预处理，使壳聚糖溶液充分溶胀分散，扩大了酶与底物的接触范围，得到分布较为集中的壳寡糖产品，大大降低了单糖的生成。在制备壳寡糖的过程中与膜分离相结合，使活性壳寡糖及时得到分离，有效的控制了壳寡糖在酶作用下的进一步降解。超滤之后纳滤，除去低聚合度的无活性的寡糖和大量的水，使获得生理活性高的某聚合度范围内的壳寡糖产品。再进行凝胶排阻色谱分离，将相同组分合并收集，冷冻干燥得壳寡糖单体，得到的低聚壳寡糖单体的纯度达到40％以上。

55    一种超声微波协同催化制备富硒壳寡糖的方法及应用   

通过以小分子壳寡糖为原料，在弱酸性的环境下加入亚硒酸盐，边加边进行机械搅拌，直到形成均匀透明粘稠状混合物，持续机械搅拌1～30分钟，将混合混合物放入超声微波发生器中超声1～45分钟，得到除去空气泡的均匀透明粘稠状混合物，微波处理后，冷却，用缓冲溶液溶液调节Ph至中性，冷冻干燥后即得富硒壳寡糖。本发明将传统复杂的合成方法进行创新，提高合成效率，整个过程无需引入生物化学类催化剂，不会对环境产生污染，得到的富硒壳寡糖具有分子量小、无催化剂污染、绿色环保的优势，且制备方法简单高效，低成本，有利于工业化生产。

56    一种高效制备聚合度为2-6的壳寡糖的方法  

采用壳聚糖酶对壳聚糖进行酶解，提供了一种生产周期较短、绿色环保的制备聚合度为2‑6的壳寡糖方法；通过控制底物浓度、加酶量和反应时间，可将90.65％的底物彻底转化为聚合度为2‑6的壳寡糖，无需膜过滤及有机溶剂沉淀，并且对常见危害广泛的植物病原菌有较好的抑制作用。

57    一种低聚壳寡糖及其制备方法   

原料：50份虾蟹壳、20‑30份盐酸、5‑7份浓硫酸、4‑5份硝酸、5‑8份硝酸、10‑20份氢氧化钠溶液和30‑50份有机溶液。该低聚壳寡糖及其制备方法，首先在取材上，虾蟹壳很容易得到，价格低廉，并且不要较为复杂的处理工艺，只需进行简单的清洗和研磨即可，完全可以使用机器代替，不需要使用较多的人工进行操作，极大的降低了人工成本，其次反应的环境也极易获得，不需要较多的能源消耗，操作起来十分环保，极低的能源消耗进一步的降低了成本，并且整个反应的时间较短，极大的提高了生产效率，从而提高了经济效益，从而达到了生产成本低的效果。

58    一种酶解和清洁氧化耦合降解壳聚糖制备壳寡糖的方法 

步骤：(1)称取壳聚糖配置成一定浓度的壳聚糖溶液，加入活化后的降解酶进行酶解反应，得到初级壳聚糖降解液；(2)向初级壳聚糖降解液中加入过氧化氢溶液，进行氧化降解反应，得到含壳寡糖的降解液；(3)将含壳寡糖的降解液自然冷却到室温后进行过滤，除去未反应完全的固体壳聚糖原料，向滤液中加入无水乙醇进行醇沉，将过滤分离出的壳寡糖，减压干燥，得到壳寡糖。以壳聚糖为原料，采用酶解和氧化降解耦合技术，实现了壳寡糖的便捷、高效、经济及清洁制备，具有工艺简单、反应条件温和、产率高及过程清洁等显著特点，是一种具有工业化应用前景的壳寡糖制备技术。

59    壳寡糖的制备方法及其制备系统  

步骤：酸解壳聚糖原料，形成胶体状原料；以设定的添加比例，向所述胶体状原料加入壳聚糖酶进行酶解反应；使用预设孔径的微滤膜对所述酶解反应后的胶体状原料进行过滤，获得微滤产物；浓缩所述微滤产物，生成脱盐浓缩液；干燥所述脱盐浓缩液，制备获得所述壳寡糖。该制备方法的反应条件温和，不发生其他副反应，具有产品均一性好，产物聚合度适中，节能、高效并且无污染的优点。同时，采用生物酶解法生产的壳寡糖具有分子量低、水溶性好、生物活性高、易被人体吸收等优势，是理想的壳聚糖降解方法。

60    一种碱性蛋白酶酶解法制备壳寡糖氨基酸液态肥的方法  

该方法包括将虾蟹壳原料，经粉碎机粉碎获得虾蟹壳粉；向所述虾蟹壳粉中加入稀盐酸进行脱钙处理，脱钙处理完成后进行过滤处理获得沉淀物以及乙酸钙液体；向所述沉淀物中加入水，搅拌混合均匀得到反应基料；调节所述反应基料的PH为5‑7，加热至50‑60℃时加入碱性蛋白酶，保持该温度进行反应；反应完成后升温蒸煮3.5‑4.3小时后进行固液分离。本申请提供的碱性蛋白酶酶解法制备壳寡糖氨基酸液态肥的方法，采用碱性蛋白酶对虾蟹壳进行分解，避免了传统工艺的酸解分解法对蛋白质生物效价的破坏，避免了浓酸浓碱液的使用，在缩短生产周期、降低生产成本的同时，减少了污染物产生。

61    一种酸降解和酶降解相结合高效制备壳寡糖的方法

首先将壳聚糖和酸溶液按照一定比例充分混合，在一定的温度下密闭保温一段时间，使壳聚糖初步降解得到重均分子量在7000～100000的中低分子量壳聚糖。然后加入适量的水溶解中低分子量壳聚糖，得到高浓度的壳聚糖溶液，并调节溶液的pH至4.2～6.0。最后加入适量的酶进行酶解，经适当的方法干燥后，即可得到重均分子量在400～4000的壳寡糖。本方法充分利用了壳聚糖酸降解和酶降解的各自优势，采用酸降解得到的中低分子量壳聚糖作为酶降解反应的原料制备壳寡糖，规避了酸降解收率较低和酶降解效率较低的难题，大幅度提高了壳寡糖生产效率，为壳寡糖广泛应用奠定良好的基础。

62    一种高含量液体壳寡糖的生产方法  

解决了高浓度液体壳寡糖的生产技术问题，其技术要点是：通过两次溶胀、两次酶解处理，即利用第一次酶解产物作为第二次溶胀的溶剂来进行生产，同时，利用特异性壳聚糖酶控制产品的分子量，本发明生产的液体壳寡糖含量可达15％‑18％，远远高于目前市场上各个生产厂家的产品浓度，所使用的特异性壳聚糖酶可有效地控制分子量在1000‑3000Da。得到的产品可无需进行常规的浓缩，直接进行喷雾干燥得到固体产品，减少了设备、人力、物力等投入，降低生产能耗，从而大大降低生产成本，极大提高生产效率。

63    一种无酸壳寡糖的制备方法

包括以下步骤：将壳聚糖溶于盐酸溶液，加入固定化酶进行酶解，超声波辅助酶解，得到酶解液；对酶解液依次进行超滤膜分离、纳滤膜分离，得到壳寡糖浓缩液；壳寡糖浓缩液通过阴离子交换柱；喷雾干燥，得到无酸壳寡糖，本发明将酶解法与酸解法相结合，辅以超声波溶解，有效缩短酶解法的反应时间，降低生产成本，同时，阴离子交换柱使得壳寡糖中不含酸根离子，打破传统壳寡糖的应用瓶颈，在食品、医药和化妆品领域有着广阔的应用前景，提高壳寡糖的产率，减少环境污染。

64    一种基于膜分离的壳寡糖制备方法 

步骤：(1)取1‑20g的壳聚糖底物以纤维素酶降解，在一定条件下充分反应结束后，再将酶解后的溶液加热煮沸一定时间，冷却后离心除酶留取上清液备用；(2)取一定量反应后的壳聚糖上清液混合等量的甲醛，对混合液进行搅拌后静置一段时间；(3)观察搅拌静置后混合液的状态，如浑浊，将液体过滤留下沉淀，以40‑60％浓度的甲醛进行清洗，完成后对其进行正空干燥。本发明通过将膜分离手段与酶法制备壳寡糖复合，在对壳寡糖进行制备的过程中进行膜分离提纯，该方法既降低了酶的消耗，提高了产品的质量和纯度，且大大降低了生产成本。

65    一种淀粉酶水解制备壳寡糖螯合硒的方法 

步骤：1)壳聚糖的溶解；2)硒酸盐螯合反应；3)淀粉酶水解；4)壳寡糖螯合硒的纯化；5)成品制备。本技术利用高分子量壳聚糖游离氨基螯合无机硒，进一步通过淀粉酶水解方式制备低分子量壳寡糖螯合硒，该产品能通过作物叶片吸收，提高果蔬中硒含量，同时避免无机硒的毒性，对高品质农业发展具有显著作用。

66    一种超临界二氧化碳流体酶解制备壳寡糖的方法    

包括以下步骤：将壳聚糖溶液经研磨处理，喷雾干燥，得到预处理的壳聚糖粉末；将海藻酸钠溶液中加入戊二醛溶液中，室温下搅拌，加入壳聚糖酶溶液，低温搅拌交联，得到固定壳聚糖酶的海藻酸钠水溶胶，经超声波活化处理，得到活化的固定壳聚糖酶；将预处理的壳聚糖加入到超高压反应釜中，加入活化的固定壳聚糖酶，通入二氧化碳气体，加压加热使二氧化碳至超临界状态，继续升温至酶解温度，酶解，得到壳寡糖。本发明将微米级壳聚糖粉末和交联固定于海藻酸钠水凝胶体系的壳聚糖酶作为原料，借助超临界二氧化碳流体的超溶解性能，制备得到操作简便、效率高，分子量窄的壳寡糖。

67    一种基于高压剪切效应的壳寡糖绿色制备工艺

其特征在于，将壳聚糖溶液加入高压匀质机中，采用循环匀质模式，通过调整匀质压力、匀质时间，即可将壳聚糖溶液降解成壳寡糖溶液。本工艺绿色无污染，不使用有毒害的有机试剂，零排放，所得产品壳寡糖相较现有酸解或酶解工艺色泽较浅，呈白色或黄白色，品质较好。

68    一种用蜗牛酶制备壳寡糖的方法及其用途  

提供的用蜗牛酶制备壳寡糖的方法，对蜗牛酶酶解壳聚糖的酶解时间、酶解温度、底物浓度、酶底质量比等具体的工艺条件进行探索和优化，提高酶解效率，结合冷冻干燥法，保持了壳寡糖的性状，便于产品的保存和进一步使用，为蜗牛酶制备壳寡糖的大生产提供依据。本发明制得的壳寡糖还可以显著的改善特发性肺纤维化大鼠模型的纤维细胞活化，对特发性肺纤维化具有很好的改善作用，有利于特发性肺纤维化患者的康复。

69    一种复合酶制备的壳寡糖及其制备方法

提供的复合酶制备的壳寡糖，制备方法包括以下步骤：将壳聚糖溶于醋酸‑醋酸钠缓冲溶液中，然后在壳聚糖溶液中加入复合酶酶液酶解，酶解完成后，将所得到的酶解液过滤后采用透析法透析滤液，最后将所得透析液进行浓缩干燥，即得。该壳寡糖分子量小，聚合度集中，产量高，更加适用于医药，食品，化妆品等领域，并且制备方法操作简便，原料成本低，具有良好的工业推广性和实用性。

70    一种低分子量壳寡糖及其制备方法

包括将壳聚糖溶解于醋酸‑醋酸钠缓冲溶液中，配制壳聚糖溶液，向壳聚糖溶液中加入一种复合酶液酶解，酶解完成后采用透析法透析滤液，将所得透析液浓缩后进行喷雾干燥等步骤。本发明提供制备方法具有低分子量壳寡糖产量高、条件简便、制备所需时间短，所用酶价廉易得，生产成本低等优点，适于大范围推广应用。